为什么PCR仪要热盖？
发布日期：2024-11-19 00:45 点击次数：51
我们在逆转录、跑PCR、跑qPCR时，一般会设置105℃加热盖子，有时候甚至会发现管盖被加热变形。那么为什么要热盖呢？不热盖行不行呢？
🌡 由于PCR反应体系中是液体，在升温过程中，会有产生蒸气，上升的蒸气会在管盖处凝结，使得PCR反应体积遭到改变，影响实验结果。
🔬 早期的PCR仪是没有热盖的，通过在PCR反应液中加入石蜡油（或矿物油）来防止PCR反应液蒸发。但反应完成后石蜡油不好除干净（比如将PCR反应液与石蜡油一起冷冻，取出后用手将管捂热，石蜡油先化开，立即将石蜡油用枪吸出，但并不能完全吸干净）。
🆕 现在出现了带热盖的PCR仪，通过更高的温度加热盖子，防止蒸发的水汽在管盖上凝结。反应液中的水份还是会有部分变成蒸汽在管中，只是不会凝结在管盖上（如果没有热盖也不加石蜡油，反应管中的水份会全都凝结在最高未知的管盖上的）。
💡 另一点小tip：PCR最后刚刚结束工作时的温度一般都是4℃，关机后空气中的水蒸气容易附着在仪器表面形成冷凝水。为了保护设备，关闭PCR后最好开着盖子，让这些水珠慢慢蒸发。4℃离心机也是同样的道理。
